上海無需染色紡錘體紡錘體結(jié)構(gòu)

紡錘體是卵母細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中形成的一種微管結(jié)構(gòu)，負(fù)責(zé)精確分離染色體。然而，紡錘體對環(huán)境溫度、滲透壓等外部條件極為敏感，在冷凍保存過程中容易發(fā)生損傷，導(dǎo)致染色體分離異常，進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。因此，如何有效監(jiān)測和評估冷凍過程中紡錘體的變化，成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題。紡錘體實時成像技術(shù)的出現(xiàn)，為這一問題的解決提供了可能。紡錘體實時成像技術(shù)主要利用高分辨率顯微鏡結(jié)合熒光標(biāo)記技術(shù)，對卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行實時、動態(tài)的觀察和記錄。常用的熒光標(biāo)記方法包括使用綠色熒光蛋白（GFP）標(biāo)記微管蛋白，以及利用特定抗體對紡錘體相關(guān)蛋白進(jìn)行染色。通過這些方法，研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態(tài)、位置、動態(tài)變化等信息，從而準(zhǔn)確評估冷凍過程中紡錘體的穩(wěn)定性和完整性。紡錘體的形成需要消耗大量的能量和原材料。上海無需染色紡錘體紡錘體結(jié)構(gòu)

Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù)，無需對卵母細(xì)胞進(jìn)行染色，即可實時、清晰、高對比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像，對ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評價等有很好的輔助作用。

主要應(yīng)用ICSI：在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細(xì)胞，避免卵的破裂損傷，增強胚胎的發(fā)育潛能。卵評估：利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級，改善對胚胎的選擇。體外成熟評估：在未成熟卵催化（IVM）過程判斷成熟期，判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識別紡錘體，而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制：利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級，改善對胚胎的選擇。

核移植：顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì)，使得核移植的成功率增加了80%，并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究：對冷凍的初級卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析，從而判斷卵的發(fā)育力，改善妊娠率。紡錘體研究：檢測胚胎中紡錘體的發(fā)育過程，確定正常和非正常分裂率（只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡）?？梢詫θ旧w非正常的或非整倍體的胚胎成像，從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究：測量卵母細(xì)胞的透明帶；準(zhǔn)確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化，判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài) 香港輔助生殖紡錘體胚胎植入紡錘體在細(xì)胞分裂完成后迅速解體，為細(xì)胞質(zhì)分裂提供空間。

在有絲分裂過程中，紡錘體的形成和功能是高度協(xié)調(diào)的。從前期到中期，紡錘體逐漸成熟，染色體被精確排列在細(xì)胞的中間區(qū)域。到了后期和末期，紡錘體開始分解，將染色體拉向細(xì)胞的兩極，并完成胞質(zhì)分裂。這一過程中，紡錘體的微管通過縮短和伸長來協(xié)調(diào)染色體的移動和定位，確保遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞。雖然無絲分裂過程中不形成明顯的紡錘體結(jié)構(gòu)，但紡錘體的相關(guān)成分（如微管和動力蛋白）仍在細(xì)胞分裂中發(fā)揮作用。例如，在質(zhì)體分裂中，紡錘體成分同樣起到了精確定位和運動染色體的作用。在減數(shù)分裂過程中，紡錘體的形成和功能更加復(fù)雜。以人卵母細(xì)胞為例，其紡錘體在減數(shù)分裂過程中會經(jīng)歷一段較長時間的“多極紡錘體”階段，而后才形成雙極狀紡錘體。這一過程需要多種關(guān)鍵蛋白（如HAUS6、KIF11和KIF18A）的參與和調(diào)控。紡錘體的正確組裝和雙極化對于保證卵母細(xì)胞的正常發(fā)育和受精至關(guān)重要。

為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷，研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細(xì)胞骨架保護(hù)劑，如紫杉醇（Taxol）。紫杉醇能夠穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu)，防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術(shù)，研究者可以實時監(jiān)測紫杉醇對紡錘體的保護(hù)效果，評估其在冷凍保存過程中的作用機制。此外，還可以進(jìn)一步觀察解凍后卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能，為臨床應(yīng)用提供可靠依據(jù)。無需對細(xì)胞進(jìn)行固定和染色，保持細(xì)胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r監(jiān)測紡錘體的形態(tài)變化，評估冷凍效果。能夠捕捉到細(xì)微的紡錘體形態(tài)變化，提高評估的準(zhǔn)確性。在細(xì)胞分裂過程中，紡錘體的形成和功能受到嚴(yán)格的調(diào)控。

    紡錘體成像技術(shù)的中心在于提高成像的分辨率和速度，以捕捉紡錘體的精細(xì)結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化。以下是幾種主要的紡錘體成像技術(shù)的技術(shù)原理：結(jié)構(gòu)光照明顯微鏡（SIM）：SIM通過引入已知的空間調(diào)制光場，使樣品發(fā)出具有特定空間頻率的熒光信號。通過采集多個不同空間頻率的熒光圖像，并利用算法進(jìn)行重建，SIM可以實現(xiàn)超越傳統(tǒng)熒光顯微鏡分辨率的成像。這種方法不僅提高了成像的分辨率，還保持了較快的成像速度和較好的細(xì)胞活性。受激輻射損耗顯微鏡（STED）：STED利用一束聚焦的激光束（稱為STED束）來抑制樣品中特定區(qū)域的熒光信號。通過精確控制STED束的位置和強度，STED可以實現(xiàn)超越衍射極限的成像分辨率。這種方法特別適用于觀測紡錘體等復(fù)雜結(jié)構(gòu)中的精細(xì)細(xì)節(jié)。單分子定位顯微鏡（SMLM）：SMLM通過檢測樣品中單個熒光分子的位置來實現(xiàn)高分辨率成像。由于熒光分子的隨機閃爍特性，SMLM可以在時間域上分離不同分子的熒光信號，從而實現(xiàn)對單個分子的精確定位。這種方法不僅提高了成像的分辨率，還提供了對紡錘體中單個微管和蛋白質(zhì)分子的動態(tài)變化的觀測能力。 紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的動態(tài)變化揭示了細(xì)胞分裂過程中分子層面的奧秘。香港非侵入式成像紡錘體卵冷凍研究

紡錘體的異?？赡軐?dǎo)致細(xì)胞分裂過程中的停滯或凋亡。上海無需染色紡錘體紡錘體結(jié)構(gòu)

在紡錘體卵冷凍過程中，利用紡錘體實時成像技術(shù)可以實時監(jiān)測紡錘體的變化。通過觀察冷凍過程中紡錘體的形態(tài)、位置及動態(tài)變化，研究者可以判斷冷凍保護(hù)劑的效果、冷凍速率等因素對紡錘體的影響，從而優(yōu)化冷凍方案，減少紡錘體損傷。解凍后，利用紡錘體實時成像技術(shù)可以對卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行再次評估。通過比較解凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性，研究者可以判斷冷凍過程對紡錘體的損傷程度，并篩選出紡錘體形態(tài)完好的卵母細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作，提高受精率和胚胎發(fā)育質(zhì)量。上海無需染色紡錘體紡錘體結(jié)構(gòu)