三角培養(yǎng)瓶是細(xì)胞培養(yǎng)中的常用耗材,也可用于培養(yǎng)基的配制、混合及儲(chǔ)存。利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過(guò)濾:濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養(yǎng)瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角培養(yǎng)瓶,很多不能超過(guò)150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。培養(yǎng)基制備器解凍血清時(shí),請(qǐng)按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)!培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個(gè)主要步驟:簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,必須將其過(guò)濾并澄清液體介質(zhì)必須完全澄清,普通液體介質(zhì)可用濾紙過(guò)濾,濾紙應(yīng)折成折扇狀或漏斗狀,以免濾紙因水力不均而破裂。當(dāng)溫度較高時(shí),培養(yǎng)基可以用干凈的白天鵝絨過(guò)濾。新制肉、肝、血、馬鈴薯等濾液,必須用絲絨布過(guò)濾,再用濾紙一次又一次地過(guò)濾。若過(guò)濾方法不能滿足澄清的要求,則應(yīng)采用蛋清過(guò)濾。需要對(duì)介質(zhì)分類處理,按培養(yǎng)基及試管內(nèi)其它燒瓶使用的容器、用途分為適當(dāng)。貨運(yùn)量超過(guò)每2個(gè)集裝箱3個(gè)容量包裝的要求。封堵也是容器外包,可用防水防潮紙塞紙封堵容器內(nèi)棉。電動(dòng)式裝配機(jī)采用定量很好的重用或半自動(dòng)解。預(yù)處理和預(yù)處理對(duì)滅菌容器的清洗要干燥,滅菌時(shí)要徹底,培養(yǎng)基要干燥。一只小玻璃瓶批培養(yǎng)基被檢測(cè)出,培養(yǎng)基被一批pH批作為該值基準(zhǔn)時(shí),應(yīng)被分成20mL的培養(yǎng)基進(jìn)行消毒處理。內(nèi)蒙古不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):溫度探頭測(cè)量培養(yǎng)基實(shí)際溫度。
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。提供和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。
培養(yǎng)基的配制:分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,很多不能超過(guò)150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4~5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4ml,約試管的1/5高度。包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面:滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基制備器負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過(guò)溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生??諝鈮嚎s機(jī)是內(nèi)置的。
高壓滅菌造成培養(yǎng)基結(jié)焦焦化問(wèn)題:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,檢測(cè)人員發(fā)現(xiàn)在高壓滅菌后的培養(yǎng)基有結(jié)焦焦化現(xiàn)象。微生物認(rèn)為造成這種現(xiàn)象是:控制培養(yǎng)基在容器中不要超過(guò)百分之八十,避免填充過(guò)多。注意控制高壓滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過(guò)121度,而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長(zhǎng)時(shí)間存放。以上原因都會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基結(jié)焦焦化。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置1天,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。選購(gòu)時(shí)需結(jié)合樣本量、成分敏感性及預(yù)算,優(yōu)先選擇控溫精確、升/降溫速度快且具備無(wú)菌保護(hù)設(shè)計(jì)的設(shè)備。吉林全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
冷卻過(guò)程中需確保密閉性(如帶無(wú)菌過(guò)濾膜的通風(fēng)口),避免污染。培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
培養(yǎng)基的種類:培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、病菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)