在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 則是結合了高保真性與實時監(jiān)測功能的選擇。這種預混液不僅繼承了Phusion DNA聚合酶的高保真特性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段,極大地提升了實驗效率和準確性。Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Phusion DNA聚合酶以其保真性而聞名,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實驗的推薦工具。同時,Phusion酶的延伸速度可達15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,提高了實驗效率。熒光染料的加入是該預混液的一大亮點。這種染料能夠在PCR過程中實時監(jiān)測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。實驗人員無需額外添加染料或進行復雜的后處理,即可直接在PCR儀上觀察擴增曲線,從而實現(xiàn)快速、準確的定量分析。這種設計不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的誤差。此外,Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。Pfu酶的熱穩(wěn)定性優(yōu)于Taq酶,即使在98℃的高溫下也能保持活性,特別適合高GC含量模板的擴增。Recombinant Cynomolgus NTS1 Protein,His Tag
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來源于嗜冷海洋細菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,并在DNA中產(chǎn)生無堿基位點(AP位點),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點與傳統(tǒng)UDG酶相比,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對溫度極為敏感,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場景。此外,該酶對單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對RNA或不含尿嘧啶的DNA無作用。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會對檢測體系產(chǎn)生抑制。應用場景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導致的假陽性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應中,熱敏UDG酶可在逆轉錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在使用過程中,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存。此外,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會對反應產(chǎn)生抑制。Recombinant Human IGF2R Domain 1-3 Protein,His-Avi TagPfu酶的擴增速度較Taq酶稍慢。經(jīng)過基因改造的Pfu酶擴增速度可達4 kb/min,是普通Pfu酶的8倍。
Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種專為血液樣本直接PCR擴增設計的即用型預混液,能夠直接從全血樣本中進行基因擴增,無需進行復雜的DNA提取和純化步驟。產(chǎn)品特點該預混液含有經(jīng)過基因工程改造的耐血DNA聚合酶(如HemoTaq? DNA Polymerase),這種聚合酶對血液中的血紅素及其他PCR抑制劑表現(xiàn)出很強的耐受性,能夠直接用于EDTA、肝素或檸檬酸鈉抗凝血樣本的檢測。此外,該預混液能夠擴增長達5 kb的DNA片段,并且對不同抗凝劑處理的血液樣本均表現(xiàn)出良好的兼容性。預混液的無染料配方使其適用于多種后續(xù)應用,如凝膠電泳分析、測序或克隆,而無需擔心染料對結果的干擾。應用場景Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 廣泛應用于抗凝血樣本中基因組DNA的直接擴增、基因分型、微生物檢測(如細菌、病毒)以及基因敲除或轉基因小鼠的基因型分析。其耐血能力可達20%-50%,在20 μL的PCR體系中,通??杉尤?-4 μL的全血樣本。此外,該預混液適用于多種抗凝劑處理的血液樣本,但優(yōu)先推薦使用EDTA抗凝血,因為EDTA可以更好地抑制核酸降解。
Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種為植物樣本直接PCR擴增設計的即用型預混液,能夠直接從植物組織中進行基因擴增,無需復雜的DNA提取和純化步驟。這種預混液為植物基因組學研究提供了一種快速、高效且經(jīng)濟的解決方案。產(chǎn)品特點Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 含有經(jīng)過優(yōu)化的耐植物抑制劑的DNA聚合酶,能夠有效耐受植物組織中的多酚、單寧、多糖等常見抑制劑。這種預混液可以直接用于新鮮或干燥的植物組織,如葉片、根莖、種子等,無需進行繁瑣的DNA提取過程,很大程度地節(jié)省了時間和人力成本。此外,該預混液的無染料配方使其適用于多種后續(xù)應用,如凝膠電泳分析、測序或克隆,而不會對實驗結果產(chǎn)生干擾。其優(yōu)化的反應緩沖體系能夠確保高特異性和高靈敏度的擴增效果,即使對于低豐度的基因也能實現(xiàn)高效擴增。應用場景Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 廣應用于植物基因組學研究、遺傳育種、基因分型、轉基因植物檢測以及植物病原體檢測等領域。它特別適合需要快速檢測植物樣本的場景,例如田間樣本的即時分析、植物品種鑒定以及大規(guī)?;蚝Y查。在基因編輯過程中,Pfu DNA Polymerase 可用于合成高質量的單鏈或雙鏈DNA修復模板。
Taq DNA聚合酶:分子生物學的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學領域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈式反應)技術中發(fā)揮著重要作用,極大地推動了基因擴增、測序和診斷技術的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實現(xiàn)高效的循環(huán)擴增。近年來,科學家們通過對Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實驗需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長片段PCR擴增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測技術,如“MeltArray”技術,實現(xiàn)了在單次反應中檢測多個靶點。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應用不僅極大地簡化了DNA擴增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測和個性化醫(yī)療等領域提供了強大的技術支持。Endo H 的活性受 pH 值的強烈影響,通常在酸性條件下表現(xiàn)出好的活性,一般合適 pH 范圍在 5.0-6.0 左右。Recombinant Cynomolgus NTS1 Protein,His Tag
該預混液能夠擴增長達5 kb的DNA片段,并且對不同抗凝劑處理的血液樣本均表現(xiàn)出良好的兼容性。Recombinant Cynomolgus NTS1 Protein,His Tag
一、產(chǎn)品特點高純度與高質量dNTPMix(25mMeach)采用高純度原料,每種核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)的濃度均為25mM,純度≥99%(HPLC檢測),確保實驗結果的可靠性。此外,產(chǎn)品經(jīng)過嚴格檢測,不含DNase、RNase和核酸外切酶,避免了核酸降解的風險。穩(wěn)定性和兼容性該產(chǎn)品在-20°C下可穩(wěn)定保存至少12個月,且在常規(guī)分子生物學實驗中表現(xiàn)出良好的兼容性,適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和高保真酶。操作便捷性dNTPMix為預混溶液,減少了多次移液帶來的誤差,提高了實驗效率。此外,產(chǎn)品可以直接用于PCR、cDNA合成等實驗,無需額外處理。二、性能表現(xiàn)高效擴增能力在PCR實驗中,dNTPMix(25mMeach)能夠支持長片段DNA的高效擴增。例如,使用高保真酶時,可輕松擴增長達20kb的DNA片段。這種高效性使其在基因克隆和復雜模板擴增中表現(xiàn)出色。靈敏度與特異性dNTPMix在qPCR實驗中表現(xiàn)出良好的線性關系,靈敏度可達到單拷貝水平。此外,其高純度和低雜質含量減少了非特異性擴增的可能性,提高了實驗的特異性和重復性。Recombinant Cynomolgus NTS1 Protein,His Tag