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功能:當外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質構成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。外泌體提?。撼x法是較常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
外泌體項目獲批學科方向:從統(tǒng)計來看,與前年相似外泌體立項集中的領域還是一些病癥學,近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,耐藥性,檢測等方面有關。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer(IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進維持ai癥干細胞樣細胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉運p-STAT3可促進結直腸ai細胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細胞外囊泡相關的miRNA作為子宮內膜ai分子標志物的可能性。此外,在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病,中醫(yī)學及其他領域也有不少外泌體相關項目中標。外泌體提取試劑直銷價外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術已被許多臨床科研機構普遍地應用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷。上海正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價外泌體提取:使用抗體包被珠子的分離不適合從大量樣本中獲得外泌體。
研究探討了外泌體是否可以作為RNAi的有效載體的可能性。與脂質體和其他合成藥物納米顆粒載體不同,外泌體含有可能增強內吞作用的跨膜和膜錨定蛋白,從而促進其內容物的遞送。CD47是外泌體蛋白質之一,是一個普遍表達的整合素相關跨膜蛋白,其部分功能可以保護細胞免受吞噬作用。CD47是信號調節(jié)蛋白α(SIRPα,也稱為CD172a)的配體,CD47-SIRPα間的結合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號,從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進胰腺病細胞增殖,增強胞飲作用從而促進一些病癥細胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細胞有一定毒性作用,但使用外泌體能夠較小化對細胞的毒性。研究人員發(fā)現(xiàn),CD47和病基因KRAS驅動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,并增強胰腺病細胞對外泌體的特異性。所以,外泌體的這種特性增強了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實驗PDAC小鼠模型的總生存期。
外泌體的提取方法,先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質干細胞進行饑餓培養(yǎng),這樣可使干細胞處于正常生長狀態(tài),不會被克制生長增殖,其所分泌的外泌體所包含的有效物質也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體,然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細胞及其碎片,用100kd超濾管對低速差速離心后的離心液進行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液,將超濾液經(jīng)過第三離心處理去除雜質后直接用0.22μm過濾器過濾除菌,過濾掉粒徑為220nm以上的物質,進一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液,因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,這樣過濾除菌效率得到較大提高,較后將濃縮液進行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不高的問題。
外泌體(exosome)是所有細胞釋放出的細菌大小的顆粒。它們天然地存在于血液中。根據(jù)來自美國德州大學MD安德森一些疾病中心的一項新的研究,對外泌體進行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法。論文通信作者為德州大學MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學系研究員RaghuKalluri博士。在這項新的研究中,經(jīng)過基因修飾的外泌體(被稱作iExosome)能夠運送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,從而導致胰腺病模式小鼠病情緩解,增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾(RNAi)的靶向方法:利用這些天然的納米顆粒(即外泌體)運送小干擾RNA(siRNA)或短發(fā)夾RNA(shRNA)分子來靶向胰腺病細胞中的KRAS突變基因,從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負荷和存活。他們證實外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用,這是因為這些納米大小的囊泡(即外泌體)輕松地在體內遷移和進入靶細胞(包括病細胞)中。外泌體的提取分離:超速離心法(差速離心)。鄭州外泌體提取試劑哪里買
用于外泌體提取的體液收集注意事項:抽血時間。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
研究中研究人員發(fā)現(xiàn),胃病細胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征,并促進胃病細胞在體外和體內的遷移。此外,研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導的遷移活動。通過使用質譜方法,研究人員確定載脂蛋白E(ApoE)是M2巨噬細胞衍生的外泌體中高度特異性和有效的蛋白質。ApoE是一種M2特異性且高度豐富的來源于M2外泌體的蛋白質,是決定胃病細胞遷移潛力的主要驅動因素。然而,來自ApoE-/-的小鼠M2巨噬細胞的外泌體在體外和體內對胃病細胞的遷移沒有顯著影響。在機制上,M2巨噬細胞衍生的外泌體介導ApoE啟動的PI3K-Akt信號通路,并在TAM和受體胃病細胞之間進行細胞間轉移,促進細胞骨架的遷移??偟膩碚f,該研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導的功能性ApoE蛋白從TAM轉移到一些病癥細胞,促進了胃病細胞的遷移。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家