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Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過(guò)改良的Taq DNA聚合酶,專為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計(jì)。它通過(guò)結(jié)合一種溫度敏感的抑制劑(如核酸適配體或抗體)來(lái)實(shí)現(xiàn)熱啟動(dòng)功能。在室溫下,抑制劑與酶結(jié)合,阻止Taq酶的活性,從而避免因引物錯(cuò)配或二聚體形成導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增。當(dāng)反應(yīng)體系升溫至PCR循環(huán)條件時(shí),抑制劑釋放,酶活性被啟動(dòng),確保反應(yīng)在高溫下特異性進(jìn)行。與普通Taq酶相比,Hot-Start Taq DNA Polymerase 的優(yōu)勢(shì)在于其提高了PCR的特異性和重復(fù)性,同時(shí)減少了因非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致的背景信號(hào)。這種酶還支持在室溫下配制反應(yīng)體系,無(wú)需額外的高溫啟動(dòng)步驟,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。此外,Hot-Start Taq DNA Polymerase 適用于多種復(fù)雜的PCR應(yīng)用場(chǎng)景,包括常規(guī)PCR、多重PCR、高GC含量模板擴(kuò)增以及甲基化分析等。例如,某些版本的Hot-Start Taq酶經(jīng)過(guò)優(yōu)化,能夠擴(kuò)增經(jīng)過(guò)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA,這對(duì)于表觀遺傳學(xué)研究具有重要意義。總之,Hot-Start Taq DNA Polymerase 通過(guò)其獨(dú)特的熱啟動(dòng)機(jī)制,為PCR反應(yīng)提供了更高的特異性和靈敏度,是分子生物學(xué)研究和診斷應(yīng)用中的理想選擇。由于Pfu DNA Polymerase 對(duì)引物的質(zhì)量要求較高,使用純度高的引物可以減少由于引物錯(cuò)誤導(dǎo)致的非目標(biāo)突變。PTD-p65-P1 Peptide
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來(lái)源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,并在DNA中產(chǎn)生無(wú)堿基位點(diǎn)(AP位點(diǎn)),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點(diǎn)與傳統(tǒng)UDG酶相比,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對(duì)溫度極為敏感,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場(chǎng)景。此外,該酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對(duì)RNA或不含尿嘧啶的DNA無(wú)作用。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會(huì)對(duì)檢測(cè)體系產(chǎn)生抑制。應(yīng)用場(chǎng)景去除PCR產(chǎn)物污染:通過(guò)降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應(yīng)中,熱敏UDG酶可在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在使用過(guò)程中,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存。此外,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會(huì)對(duì)反應(yīng)產(chǎn)生抑制。Recombinant Human EGF ProteinPhusion DNA Polymerase的錯(cuò)誤率比Taq DNA聚合酶低50倍,比Pyrococcus furiosus DNA聚合酶低6倍。
AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型2×預(yù)混液,專為快速、有效的PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)。該預(yù)混液包含Hieff Canace® AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase、dNTPs、優(yōu)化的緩沖體系以及電泳指示染料,能夠明顯提高PCR反應(yīng)的速度和特異性。產(chǎn)品特點(diǎn)該預(yù)混液的重要優(yōu)勢(shì)在于其快速擴(kuò)增能力,擴(kuò)增速度可達(dá)15秒/kb,甚至在1 kb以內(nèi)的片段中,極限速度可達(dá)5秒/kb。此外,預(yù)混液中的高保真DNA聚合酶具有3'-5'外切酶活性,能夠有效降低錯(cuò)誤率,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。其優(yōu)化的緩沖體系和延伸因子使其能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)13 kb的片段,適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增。預(yù)混液中還添加了電泳指示染料,PCR產(chǎn)物可直接進(jìn)行電泳,無(wú)需額外添加上樣緩沖液。此外,該產(chǎn)品含有特異保護(hù)劑,即使經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融,仍能保持穩(wěn)定的活性。應(yīng)用場(chǎng)景AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 廣應(yīng)用于常規(guī)PCR、基因克隆、復(fù)雜模板擴(kuò)增以及高通量建庫(kù)等場(chǎng)景。其快速擴(kuò)增能力和高特異性使其特別適合大規(guī)模基因檢測(cè)、菌落PCR以及微量DNA的檢測(cè)??傊珹dvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 憑借其快速擴(kuò)增、高特異性和便捷性,為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了高效的解決方案,尤其適合需要快速結(jié)果和高通量操作的場(chǎng)景。
Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種專為血液樣本直接PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,能夠直接從全血樣本中進(jìn)行基因擴(kuò)增,無(wú)需進(jìn)行復(fù)雜的DNA提取和純化步驟。產(chǎn)品特點(diǎn)該預(yù)混液含有經(jīng)過(guò)基因工程改造的耐血DNA聚合酶(如HemoTaq? DNA Polymerase),這種聚合酶對(duì)血液中的血紅素及其他PCR抑制劑表現(xiàn)出很強(qiáng)的耐受性,能夠直接用于EDTA、肝素或檸檬酸鈉抗凝血樣本的檢測(cè)。此外,該預(yù)混液能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)5 kb的DNA片段,并且對(duì)不同抗凝劑處理的血液樣本均表現(xiàn)出良好的兼容性。預(yù)混液的無(wú)染料配方使其適用于多種后續(xù)應(yīng)用,如凝膠電泳分析、測(cè)序或克隆,而無(wú)需擔(dān)心染料對(duì)結(jié)果的干擾。應(yīng)用場(chǎng)景Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 廣泛應(yīng)用于抗凝血樣本中基因組DNA的直接擴(kuò)增、基因分型、微生物檢測(cè)(如細(xì)菌、病毒)以及基因敲除或轉(zhuǎn)基因小鼠的基因型分析。其耐血能力可達(dá)20%-50%,在20 μL的PCR體系中,通??杉尤?-4 μL的全血樣本。此外,該預(yù)混液適用于多種抗凝劑處理的血液樣本,但優(yōu)先推薦使用EDTA抗凝血,因?yàn)镋DTA可以更好地抑制核酸降解。優(yōu)化的緩沖體系以及熒光染料,能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)25 kb的基因組片段、14 kb的cDNA片段以及40 kb的λDNA片段。
產(chǎn)品特點(diǎn)50× ROX Reference Dye的主要成分是高純度的5-ROX甘氨酸,其濃度為25 μM,以50倍濃縮的形式提供。這種染料的熒光強(qiáng)度在PCR過(guò)程中保持穩(wěn)定,不會(huì)因擴(kuò)增反應(yīng)而發(fā)生變化,因此可以作為理想的內(nèi)部參考信號(hào)。其激發(fā)波長(zhǎng)為575 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為602 nm,與多數(shù)qPCR儀器的光學(xué)系統(tǒng)兼容。此外,ROX Reference Dye具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,能夠在-20℃避光保存長(zhǎng)達(dá)2年,短期使用時(shí)可在4℃保存。這種穩(wěn)定性使其在實(shí)驗(yàn)中能夠提供一致的熒光信號(hào),減少因試劑變質(zhì)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差。性能優(yōu)勢(shì)校正孔間誤差:qPCR實(shí)驗(yàn)中,由于加樣量、孔位置、試管壁厚度等因素,不同孔之間的熒光信號(hào)可能存在差異。50× ROX Reference Dye能夠通過(guò)校正這些非PCR相關(guān)的變化,顯著提高定量的精確度。提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性:通過(guò)使用ROX染料對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理,實(shí)驗(yàn)人員可以在較少的重復(fù)實(shí)驗(yàn)中獲得更精確的結(jié)果,從而節(jié)省時(shí)間和資源。適用于多種儀器:50× ROX Reference Dye兼容多種主流qPCR儀器,如ABI 5700、7000、FnCas12a產(chǎn)品不含DNA內(nèi)切酶和外切酶,也不含RNA酶,保證了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。PTD-p65-P1 Peptide
在泛素化過(guò)程中,首先泛素激起酶E1(Uba1或其他)在ATP的存在下激起泛素分子,形成E1-泛素硫酯中間體。PTD-p65-P1 Peptide
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過(guò)程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來(lái),科學(xué)家們通過(guò)對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開(kāi)發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開(kāi)發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。PTD-p65-P1 Peptide